ポリメラーゼ連鎖反応（PCR）は、ヒトDNAの短いセクションの複数のコピーの作成です。研究と結果を得るためには少量の生理的物質が必要です：痰、血液、羊水、唾液、尿など。
ポリメラーゼ連鎖反応とは
PCR法は、1998年にノーベル賞を受賞したアメリカの科学者Melisonによって開発されました。積極的に使用されます。
- 感染症の早期診断、腫瘍の病理学。
- 極めて少量のDNAの研究のための法医学的検査
- 獣医学、生物学、分子遺伝学において。
- DNAによる個人識別用
- 父性を確認する。
- たとえば生態学では、追跡時に製品の品質、人類学では。
誰がPCRを処方されていますか？
感染症の診断におけるポリメラーゼ連鎖反応は、最も正確で信頼できる分析を可能にする最も信頼できる方法の1つです。たとえば、クラミジアに関する分析の信頼性は100％に近いです。ほとんどの場合、この診断方法は、テスト中に特定の病原体を特定するのが困難な患者に処方されます。
PCR検査室テストは使用します：
- 尿路および生殖管の感染を引き起こす病原性生物を検索するために、作物または免疫学的方法を適用するときに同定することは困難である。
- 初期段階でHIVの再解析を行ったが、感染した両親の新生児など、初期解析の結果はポジティブだが疑わしい。
- 初期段階で、および患者の治療計画を個々に修正するために腫瘍病理学を確立すること。
- 遺伝性の病状の早期発見と治療の可能性について。それで、多くの将来の両親は彼らが遺伝病の保因者であるかどうか調べるためにテストしています。子供では、この方法は遺伝する病気にさらされる確率を決定します。
また、このテクニックが使用されています：
- 妊娠初期の胎児の病理学を検出するため。
- 臓器移植のための手術前の患者における - 組織の適合性を決定するために必要
- ドナーの血液中の危険な病原体を検出する。
- 隠された感染を検出するために新生児で。
- 抗ウイルス治療または抗微生物治療の結果を評価する。
なぜこの手順を踏むのですか？
PCRはほぼ100％の結果をもたらす非常に効果的な診断方法であると考えられているので、この手順が使用されます：
- 診断を確定または除外します。
- 治療の有効性の迅速な評価のために。
- 他の細菌学的、ウイルス学的技術が役に立たないことが証明されている場合、多くの場合、この方法は発達中の病理を検出するための唯一の可能な方法と考えられている。
- PCR法を用いたウイルスは、感染直後と主要症状の発症前に検出されます。
- 微生物の早期発見は迅速な治療を可能にするでしょう。
さらに、PCR分析により、生きているサンプルまたは死んでいるサンプル中の少数の微生物を迅速に検出することができます。従って、この技術は特定の病原性生物、例えば結核菌を検索するために使用される。
さらに、PCR分析が使用されます。
- 特定の種類の抗生物質に対するDNAの感受性を決定すること。可能な限り迅速に治療を開始することができます。
- 流行の蔓延を抑制するため
- 新しいタイプの微生物、病原体を識別し追跡すること。
PCRの主な種類
標準的な方法
ＰＣＲ分析は、プライマー酵素を用いて特定のＤＮＡ断片およびＲＮＡの多重倍加に基づいて行われる。このおかげで、研究者は必要な量の資料を受け取ります。
リアルタイムPCR
この種の研究では、与えられたフラグメントを識別するプロセスは各サイクルの後に始まります。この種の研究は、体内のウイルスや微生物の数に関する情報を得ること、すなわち定量分析を行うことを可能にします。
PCRからの逆転写モード
この分析は、その遺伝的塩基がRNAと命名されたウイルスのさらなる検出のために一本鎖RNAを検索するために使用される。たとえば、これはC型肝炎ウイルス、免疫不全などです。この研究を実施する際には、一本鎖ＤＮＡが構築されるという理由で特別な酵素が使用される。その後、システムは2番目のDNA鎖を修復し、従来の手順を実行します。
のための徴候
ＰＣＲ法は、感染症、産科、泌尿器科、婦人科および腎臓科、小児科などの診療所で使用されている。割り当て分析の最も一般的な指標は次のとおりです。
- 遺伝性の病状の存在下で子供の遺伝的異常を発症するリスクを決定すること。
- 妊娠を計画しているとき、または母親が子供を抱えているときに困難な状態にあるときに、両親を診断すること。
- 不妊の原因を特定するという概念の難しさ。
- 急性期に性感染症が疑われる場合、または慢性期に移行するリスクがある場合。
- 原因不明の炎症プロセスの原因を検出する。
- 保護されていないカジュアルなセックスをする。
- 特定の薬物に対する病原性微生物の感受性を決定する。
- 明白な症状なしに病原体を検出するための潜伏感染の疑い。
- 病気からの回復、すなわち遡及的診断を確認する。
また、PCRは、肝炎ウイルス、ヒト免疫不全症、サイトメガロウイルス、単純ヘルペスウイルス、風疹ウイルス、パピローマウイルスなどの病原体を正確に同定する必要がある場合にも使用されます。
そこでは、感染性単核球症、ダニ媒介性脳炎、カンジダ真菌によって引き起こされるカンジダ症、性器感染症、および結核といった感染症の判定にこの方法が使用されています。
禁忌と安全な方法なら？
この手順は身体に影響を与えることなく実行され、研究用に使用される生物学的材料のみが使用されるので、身体に対する潜在的な危険性がないことによる禁忌はありません。しかし、例えば、子宮頸管の生体材料サンプリングは膣鏡検査後には行われない。配達塗抹標本、擦り傷は、月経が終了して退院が完全に停止した後4〜7日で許可されます。
処置の準備の特徴
外来病原体のＤＮＡが検出されるＰＣＲ分析用の試料としては、体液または組織のいずれかが用いられる。試験物質の摂取は、静脈からの採血、鼻腔からの掻き取り、喉頭、子宮頸部、尿道の形で行われる。診断手順の前に、医師はどのような物質が服用されるのかを患者に説明しなければなりません：
ヘルペス感染症の分析では、単核球症は尿の分析だけでなく、咽頭からの塗抹標本を取ります。- 肝炎やトキソプラズマ症を検査するときは、静脈から血液を採取します。
- さまざまな種類のCNS損傷を診断するために、脳脊髄液が採取されます。
- 呼吸器科では、PCR分析のサンプルは胸水と痰です。
- 妊娠中に子宮内感染の研究を行う場合は、羊水、胎盤細胞を分析に使用します。
ヘルペス感染症の分析では、単核球症は尿の分析だけでなく、咽頭からの塗抹標本を取ります。結果の信頼性と正確性は、バイオマテリアルを摂取する際の無菌性と条件によって異なります。 PCR研究は非常に敏感であるので、摂取された物質のいかなる汚染も結果を歪めるかもしれません。生体材料の送達のための適切な調製は、患者にとっていかなる困難も引き起こさない。
しかし、いくつかの推奨事項があります。
- 性感染症を分析する場合は、資料の配達の3日前に親密な連絡先を除外する必要があります。
- 72時間は膣の準備の使用を停止する必要があります。
- 前日の夕方からは、調査対象地域の衛生管理はできません。
- 尿道からサンプルを採取する3〜4時間前に、排尿は除外されるべきです。
- 検査を受ける1か月前には、抗生物質の服用を中止する必要があります。
- 朝の空腹時に血液を飲食前に与えます。
- 朝の尿はトイレに行った後、滅菌容器に集められます。
PCRはどうですか？
特別な原子炉で研究を行うとき、あるサイクルが繰り返されます。
- 最初のステップ変性唾液、血液、婦人科検査およびその他の物質をアプリケータに入れ、そこで材料を加熱し、DNAを2本の鎖に分けます。
- 第二のステップ。取られた物質のわずかな冷却、それにDTC分子の必要な部分を認識しそしてそれに結合する特別な成分を加える。
- 3ステップ伸びその過程で、病原性生物のDTCの断片が完成し、そのコピーが形成されます。このサイクルが繰り返され、それが特定のＤＮＡ断片のコピーを２倍にする。
数時間以内に、このフラグメントの多数のコピーが形成され、サンプル中のそれらの存在が明らかにされる。次に結果を様々な種類の病原体のデータベースと比較する。これにより、感染の種類を特定できます。
デコード解析の特徴は？
試験の最終結果は、生物学的分析の数日後に患者に与えられます。
定性分析
この場合の否定的な結果は、試験にかけられた流体中に感染性物質が検出されなかったことを意味する。陽性の結果は、生物学的試料中の病原性ウイルスまたは細菌の検出を示す。結果が陽性であったが、同時に感染の活性化の兆候がない場合、そのような身体の状態は無症候性の健康な保因者と呼ばれます。
ほとんどの場合、これはウイルスの病理学で生体材料を服用するときに観察されます。この場合、治療は必要ありませんが、継続的な医学的管理が必要です。そのような条件下では確率があります：
- キャリアから健康な人々へのウイルスの拡散
- プロセスの活性化と病態の慢性的な形態への移行。
定量分析
定量的な結果は、特定の種類の感染症に特化した専門家によって決定されます。得られた結果に基づいて、発生の程度、病理学の段階を評価することが可能であり、それは可能な限り迅速に治療を処方することを可能にする。
